PURIFICAÇÃO PARCIAL DE PROTEASES DO VENENO DE BOTHROPS COTIARA (SERPENTES: VIPERIDAE)

Authors

  • Tiago Tuleski Lorencetti Autora para correspondência: Rua Imaculada Conceição, 1155. CEP 80215-901. Curitiba, PR.
  • André Zelanis Palitot Pereira
  • Priscila Hess Lopes
  • Elder Ribeiro Pereira
  • Viviane Kizltyka
  • Luiz Fernando Pereira
  • Selene Lobo Elifio-Esposito

DOI:

https://doi.org/10.7213/reb.v27i59.21915

Keywords:

Metaloprotease, Veneno, Serpentes, Bothrops cotiara

Abstract

Bothrops cotiara (GOMES, 1913) pode ser encontrada desde São Paulo, Minas Gerais, Rio de Janeiro, Paraná e Santa Catarina. Diversas toxinas já foram isoladas de venenos botrópicos, mas pouco se sabe sobre enzimas proteolíticas obtidas a partir do veneno de B. cotiara. Por essa razão, a caracterização de tais moléculas se faz importante. A atividade proteolítica foi medida usando caseína como substrato e por zimograma em SDS-PAGE contendo gelatina. Os resultados mostraram baixa atividade caseinolítica (7,5 U/ mg) se comparada com a de outros venenos botrópicos, mas esta baixa atividade também é encontrada no veneno de outras espécies do grupo alternatus. O zimograma mostrou maior atividade por proteínas na faixa de aprox. 95 Kda que foi inibida totalmente por EDTA (10 mM) e parcialmente pelo inibidor de serinoprotease PMSF (5 mM). Cromatografia de filtração em gel de Sephadex G-100 (130 x 2 cm) resultou em dois picos principais, com atividade proteolítica apenas no primeiro (P1). Tal fração apresentou cinética enzimática pela variação do substrato e de temperatura semelhante ao veneno bruto. Os resultados sugerem a purificação parcial de uma metaloprotease.

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Published

2005-11-24

How to Cite

Lorencetti, T. T., Pereira, A. Z. P., Lopes, P. H., Pereira, E. R., Kizltyka, V., Pereira, L. F., & Elifio-Esposito, S. L. (2005). PURIFICAÇÃO PARCIAL DE PROTEASES DO VENENO DE BOTHROPS COTIARA (SERPENTES: VIPERIDAE). Revista Estudos De Biologia, 27(59). https://doi.org/10.7213/reb.v27i59.21915

Issue

Section

Fluxo Contínuo